UNOISE2: Improved error-correction for Illumina 16S and ITS amplicon reads


Amplicon sequencing of tags such as 16S and ITS ribosomal RNA is a popular method for investigating microbial populations. In such experiments, sequence errors caused by PCR and sequencing are difficult to distinguish from true biological variation. I describe UNOISE2, an updated version of the UNOISE algorithm for denoising (error-correcting) Illumina amplicon reads and show that it has comparable or better accuracy than DADA2.




Usearch 先前在微博上介绍了很多次,主要三点: 1. 序列相似性比对, 2. 微生物多样性数据处理,逐渐构成了小生态,3. 序列处理瑞士军刀, 三点上竞争对手都很多, 第一点上 diamondRAPSearch等都是竞争对手, 第二点 vsearch 紧随其后,另外还有 [QIIMEMothur 等老牌工具, 第三个问题太多了,主要有 seqtkseqkit 等。 不过这个帖子提到的是新出炉的 UNOISE2,就是错误纠正(这类工具也很多), 包括了去除测序错误的序列,嵌合体序列,Phix 污染序列以及低复杂度序列等, 然后就可以直接构建 OTU表了, UNOISE2 流程推荐直接从最原始的序列开始, 合并双端序列、过滤、去冗余、错误纠正、序列比对、构建OTU表、一气呵成。 另外:可以增加调整序列方向这一步,需要参考序列库,比如 RDP 的序列库,或者使用 Silva 的库。

不等不提 Usearch 工具使用序列: 32位版本不管是工业界还是学术界随便用,免费, 64位版本需要进行收费了,学术界要比工业界便宜不少,现在刚进入 9.0版本,销售策略也进行了调整,从先前按年订阅, 变成现在 按大版本号订阅 ,更人性化了。


-. UNOISE algorithm

The UNOISE algorithm performs error-correction (denoising) on amplicon reads. It is implemented in the unoise command. UNOISE is designed for Illumina reads, not earlier technologies such as 454 pyrosequencing.

Correct biological sequences are recovered from the reads, resolving distinct sequences down to a single difference (sometimes) or two or more differences (almost always). I consider this approach superior to traditional OTU clustering at 97% identity because OTUs may merge different species (or more generally, different phenotypes) with distinct sequences while denoising gives the best possible resolution.

Errors are corrected as follows: – Reads with sequencing error are identified and removed. – Abundances are corrected (when the OTU table is generated). – Chimeras are removed. – PhiX sequences are removed. – Low-complexity sequences due to Illumina artifacts are removed.

Using denoised sequences as OTUs has two possible drawbacks: a single species may be split into two OTUs due to different strains or paralogs, and the sensitivity is slightly lower because UPARSE can make robust OTUs from unique sequences with abundance as low as 2 while the minimum abundance for UNOISE is around 4. I consider splitting of strains to be a good thing, because they may have different phonotypes and hence different ecological roles. Splitting due to paralogs is relatively benign (what does it matter?), and is not solved by clustering at 97% identity because paralogs have identities <97% in some cases. Splitting or lumping is unadvoidable regardless of whether the clustering identity is 97% or 100% so I would argue that it is better to resolve as many distinct biological sequences as possible. Sensitivity to unique sequences with abundance <8 (summed over all samples) is rarely important in practice.

Denoised sequences are valid OTUs (the clustering identity is 100%, if you like) and can be used to generate an OTU table in just the same way as 97% OTUs.

-. UNOISE pipeline

A UNOISE pipeline recovers biological sequences from an amplicon sequencing experiment by performing error-correction (denoising) of Illumina reads. UNOISE is not designed for other sequencing technologies, e.g. 454 pyrosequencing reads. The UNOISE algorithm is implemented in the unoise command.

See Tutorials for example scripts & data.

Reads in FASTQ format I strongly recommended starting from “raw” reads, i.e. the reads originally provided by the sequencing machine base-calling software. You should do quality filtering with USEARCH rather than using reads that have already been filtered by third-party software.

Reads in FASTA format The unoise command supports reads in FASTA format. You may need to do this if your reads have already been quality filtered by some other method and you don’t have access to the original FASTQ reads.

Sample pooling I recommend combining reads from as many samples as possible. See sample pooling for discussion.

Read quality filtering Quality filtering of the reads should be done using USEARCH because maximum expected error filtering method is much more effective at suppressing reads with high error rates than other filters, e.g. those based on average Q scores. Using a maximum expected errors of 1.0 is a good default choice (-fastq_maxee 1.0 option to fastq_filter or fastq_merge_maxee 1.0 option of fastq_mergepairs). You can use fastx_learn to estimate the error rate after filtering.

Global trimming You should trim reads to a fixed length unless the sequences are contigs generated by a paired read assembler, in which case it may not be necessary. You should also trim any primer-binding sequences at the ends of the reads. See global trimming for discussion.

Unique sequences Get the set of unique sequences with abundances using the fastx_uniques command with the -sizeout option. This will be the input file for the unoise command.

Creating an OTU table Denoised sequences are valid OTUs (the clustering identity is 100%, if you like) and can be used to generate an OTU table in just the same way as 97% OTUs. Reads must have sample identifiers for this to work. The simplest way to do this is usually to use the -relabel @ option of fastq_filter or fastq_mergepairs.

Example commands For typical Illumina reads with one pair of FASTQ files (R1 and R2) per sample.

usearch -fastq_mergepairs _R1.fastq -relabel @ -fastaout reads.fq

usearch -fastq_filter reads.fq -fastq_maxee 1.0 -fastaout filtered.fa

usearch -fastx_uniques filtered.fa -fastaout uniques.fa -sizeout

usearch -unoise uniques.fa -tabbedout out.txt -fastaout denoised.fa

usearch -usearch_global reads.fq -db denoised.fa -strand plus -id 0.97 -otutabout otu_table.txt



29 comments to UNOISE2:通过对Illumina测序平台结果错误纠正进行微生物多样性分析

  • Hello to every body, it’s my first visit of this website;
    this webpage carries remarkable and genuinely
    excellent information designed for readers.

  • Can you tell us more about this? I’d like to
    find out more details.

  • Isso é realmente deagarramento, Você é um excessivamente qualificados
    blogger. Eu tenho juntou-se seu alimentar e
    sentar para em busca de extra de seu maravilhoso postar.
    Também tenho compartilhou seu local na minha redes sociais

  • It’s actually a great and useful piece of information. I’m glad that you
    just shared this useful information with us. Please
    keep us up to date like this. Thank you for sharing.

  • My brother suggested I would possibly like this web site.
    He was once totally right. This publish
    truly made my day. You cann’t consider simply how much time I
    had spent for this info! Thanks!

  • Excellent beat ! I would like to apprentice while you amend your website,
    how can i subscribe for a blog web site? The account aided me a acceptable deal.
    I had been tiny bit acquainted of this your broadcast offered bright clear concept

  • Thanks for a marvelous posting! I seriously enjoyed reading
    it, you might be a great author. I will be sure to bookmark your blog and will often come back from now on. I want
    to encourage you to continue your great posts, have a nice holiday weekend!

  • Эссе для одиннадцатиклассников средних школ для изготовления домашних упражнений вы найдете на данном веб-ресурсе по данным темам: сочинение существует только человек философская
    проблематика пьесы на дне, сочинение по литературе на тему борис и тихон
    в пьесе островского гроза, изображение
    народов в поэме некрасова кому на руси жить хорошо сочинение, учёные обещают
    что совсем скоро будет создан эликсир
    бессмертия сочинение, сочинение на тему великая сила любви по произведению гранатовый браслет,
    что такое человечность сочинение рассуждение 15.3 вариант 10 цыбулько
    2016, сочинение по тексту русский язык в интернете это конечно же черт знает
    такое, междометия это эмоциональные сигналы выражающие реакцию говорящего на ситуацию сочинение, сочинения
    по литературе 8 класс капитанская дочка по тему долг и честь,
    сочинение по английском с переводом на тему мой
    любимый предмет в школе, человек должен излучать доброту и жить в сфере добра сочинение рассуждение, сочинение по репродукции картины н к рериха заморские гости для 4
    класса, как характеризует человека забота о живой природе сочинение рассуждение, сочинение с 1 нет сомнения человечество найдет пути ведущие
    к обновлению, сочинение по тексту с.

    качалкова на этого человека нельзя было смотреть без смеха, сочинение
    по теме легенда и действительность в
    рассказе старуха изергиль, сочинение некоторые к моему изумлению вспоминают свои школьные
    годы с неприязнью, сочинение рассуждение язык это история народа язык
    это путь цивилизации, сочинение
    рассуждение по пословице по одежке встречают по уму провожают,
    сочинения на тему доброта и жестокость в повесть максима
    горького детства, сочинение на тему взаимосвязь между человеком и живым миром природы сочинение,
    сочинение рассуждение лишь теперь я вдруг узнал понял всей душой
    вечное присутствие поэзии, напиши мини сочинение на одну из предложенных тем
    история бумажного змея, сочинение по
    роману тихий дон трагедия григория мелихова в романе тихий дон, помогите
    мне.спасите меня.я не хочу умирать.маленький кусочек
    свинца в сердце сочинение, сочинение как вы
    понимаете смысл финала текста светка оказалась золотой, справедливо ли
    народная мудрость добрый разум не
    наживают разом сочинение, нужны ли в жизни
    сочувствие и сострадание сочинение 7 класс в
    прекрасном и, сочинение с планом на тему
    образ савельича в повести капитанская дочка, как научиться писать сочинение по русскому языку егэ 2016 шаблон с примером, сочинение ребенок в момент рождения не человек а только кандидат в человека, сочинение
    рассуждение объясните как вы понимаете смысл предложения текста, проблема случайности и закономерности в жизни человека аргументы сочинение.

    Сочинение — это тип письменной школьной работы,
    предлагающий собой вывод имеющихся фантазий, познаний на заданную проблему.
    Образцы выполненных изложений:
    сочинение если хочешь победить весь мир победи самого себя достоевский в, сочинение
    на тему какие события и впечатления в жизни помогают человеку взрослеть,
    сочинение по русскому языку на тему новые слова в современном русском языке, сочинение по английскому на
    тему работа для подростков на
    английском языке, сочинение
    на тему тарас бульба 7 класс по плану тарас бульба 7 класс по плану, почему он стал как
    стал почему владимир дубровский стал разбойником сочинение
    6 класс по плану, сочинение рассуждение на тему что такое самовоспитание 9 класс огэ 15.3, ничего не понимаю медленно произнесла елена станиславовна сочинение рассуждение, сочинение по русскому языку 2 класс по картине
    шишкина утро в сосновом лесу,
    сочинение по теме почему алеша почувствовал в
    бабушке близкого человека, сочинение рассуждение по картине сыромятниковой первые зрители 6 класс, сочинение на тему и.с тургенева муму герасим главный
    герой рассказа муму, сочинение на тему поиски
    смысла жизни главных героев романа
    война и мир, сочинение на тему что такое доброта по тексту лиханова я тащился по улице, сочинение
    на тему человек и природа в сказке-были кладовая солнца пришвин, сочинение память одно из важнейших
    свойств бытия любого бытия материального духовного
    человеческого, сочинение по английскому на каком транспорте
    я предпочитаю путешествовать, сочинение по теме образ идеальной героини в романе евгений онегин краткое, как донести не
    расплескать все это и рассказать
    о весне поре великого обновления сочинение, написать сочинение о пословице
    в радости знай меру в беде не теряй веру, сенина
    нарушевич сочинение на егэ курс интенсивной подготовки легион 2016, сочинение по тексту а.лиханова мальчики и девочки
    в свои семнадцать лет, рано утром
    когда сережка вышел за хлебом во дворе не было ни души
    сочинение, сочинение в дурном обществе короленко 5 класс путь васи к правде и добру, сочинение на тему вода все смоет
    только бесчестье не может смыть сочинение, сочинение по русскому
    языку на тему мои рассуждения при выборе профессии, сочинение по евгению онегину
    сравнение ольги и татьяны в романе евгений онегин,
    сочинение на тему маленького человека
    в поэме а с пушкина медный всадник, сочинение по картине конец зимы полдень для 3 класса с опорными словами,
    сочинение 2 класса по картине ф.п толстой букет цветов бабочка и птичка, столичное
    и провинциальное дворянство в романе евгений онегин сочинение,
    напишите сочинение по прочитанному тексту пустой тратой времени являются попытки оценить взаимоотношения, сочинение по повести тарас бульба сравнительная характеристика остапа и андрия, и разбивается насмерть потому что по разумению гордых птиц сочинение 15.2, сочинение
    по роману дубровский для 6 класса по
    литературе два помещика, сочинение мертвые души на тему
    лирические отступления в поэме мертвые
    души, краткое сочинение на тему
    почему чиновники приняли хлестакова
    за ревизора, сочинение по тексту л
    жуховицкого говорят что у всякой наглости есть предел, сочинение по английскому языку на тему моя будущая
    профессия на английском языке, какое влияние старшие могут оказать
    на выбор жизненного пути сочинение, русские поэты 19 века о родине родной природе и о себе 5 класс сочинение, сочинение по
    теме в дурном обществе путь васи к правде и добру по плану,
    язык есть не только говор речь
    язык есть образ сочинение рассуждение 15.3, сочинение давно замечен парадоксальный факт особенно красивые
    люди часто бывают одиноки и
    несчастны и сочинение на тему война и мир образ андрея болконского и пьера безухова.

    Сочинение – есть отображение изобретательной функции, которая предполагает внятное, оптимальное и логическое преподнесение размышления.
    Выполненное творение на
    выбранную тему обязано таить в себе рассуждения созидателя и основываться на тех или
    иных случаях. Текст сочинения, часто, вливает расширение вопроса задачи и смастеренные на условиях данного заключения.
    Это создание запрашивает кое-каких стремлений и искусства
    в изящной литературной форме сообщить свою форму зрения.
    Этот вид задания исполняют
    как учащиеся в школе, так и учащиеся вузов.
    Бывает например так, что
    на проделывание задачи совсем не осталось времени дня, а момент времени сдачи уже
    вблизи. Или, возможно, для отдельных учащихся вузов, еще со школьной скамьи составление
    сочинительной работы вызывало препятствия.
    Не считая характеристик к содержимому, изложение подобает
    являться набросанным мастерски, совмещать причинно-последующую складность
    между составными частями, вынесено в определенном стиле, призывать заинтересованность у человека.
    В случае, если утверждать иначе, то есть разные предпосылки, из-за каковых поручение может быть не выполнено.
    Сей интернет-проект не дозволит этого.
    Вы непременно всегда сможете оформить заказ на работу
    у наших учителей и спасти
    себя лично от таких созидательных мук.
    Каким способом гарантировать себе хорошую оценку?
    Сочинение на заказ окажется набросано в минимальные временные промежутки,
    подходя абсолютно всем потребностям вашего поручения, и обеспечит вам
    лично хорошую оценку. Кроме этого, при необходимости существует реальность
    в рамках поручительного периода, протоколировать редактором корректировки и все ваши критические замечани.
    Неким студентам или подросткам причудится, что нет практически ничего элементарнее, нежели прибегнуть содействием немалыми ресурсами интернета и перекачать готовое
    сочинение конкретно там. Только надо заметить, что за такую работу вы
    лично можете извлечь плохую оценку или незачет.

    Приобретенное на нашем сайте готовое сочинение, готовый реферат, эссе или
    прочая работа (решебник по русскому
    языку 2 класс 2 часть канакина на
    рисунки сочинения, сочинение по теме в чем
    сила и художественная привлекательность базарова, сочинение нужны ли в жизни сочувствие и сострадание по рассказам кусака и юшка, сочинение по литературе на тему уроки французского уроки
    доброты 6 класс, сочинение по тексту гранину с течением времени начинаю понимать что до
    человека, сочинение по картине
    иван царевич на сером волке с устаревшими
    словами, сочинение по химии на тему художественный образ вещества или химического процесса, примерные сочинения темы итогового сочинения по литературе в 11 классе, остался один а видишь вот понимаешь кто к тебе с душой сочинение рассуждение, конспект урока по
    русскому языку в 9 классе сочинение
    о выборе профессии, сочинение
    по куприну гранатовый браслет что это было любовь или сумасшествие,
    житейские бытовые наблюдения показывают а научная психология подтверждает егэ сочинение, шаляпин в былые годы когда я был моложе я
    имел некоторое пристрастие сочинение,
    презентация по теме сочинение по картине кончаловского сирень в корзине, сочинение
    в дурном обществе на тему вася и его отец
    от вражды к пониманию, как вы понимаете слово благодарность сочинение рассуждение 15.3 по тексту, как
    вы понимаете значение слова сильный
    человек сочинение 15.3 алексеев, сочинение рассуждение образ петербурга в романе преступление
    и наказание, сочинение по возвращению
    домой из краев далеких засаживал я свой огород, сочинение какое произведение лермонтова вы бы посоветовали прочитать другу, семи-восьмилетним мальчишкой я увлекался тремя мушкетерами дюма сочинение, сочинение на тему своеобразие народного
    характера кому на руси жить
    хорошо, сочинение на тему о чем предупреждает булгаков в повести собачье сердце, сочинение на тему какого человека можно назвать культурным 7 8 предложений,
    сочинение на башкирском языке картина кузнецова допрос салавата на башкирском, сочинение рассуждение на тему к оценке достоинств
    речи мы должны подходить, запоздалые раскаяния быть может
    подобны тем добрым намерениям егэ сочинение, сочинение по химии на тему художественный образ вещества или процесса кислорода, по н галь молодой
    отец строго выговаривает четырёхлетней дочке сочинение, познакомьтесь
    с фрагментами из знаменитого
    сочинения н макиавелли государь, сочинение рассуждение по высказыванию реформатского
    местоимения выделяются, сочинение из 7 8 предложений пиши чётко и разборчиво соблюдая нормы речи, сенина русский язык подготовка к огэ 2017 30 вариантов
    ответы сочинения, лес-очень ранимое существо и правила поведения в нем должны быть строгими
    сочинение, сочинение автор и его герой в романе а.с.пушкина евгений онегин сочинение, сочинение на тему российская грамматика есть знание как говорить и писать, сочинение по русскому языку
    егэ по тексту лосеву оставляя пока в стороне, сочинение на про ивана васильевича
    молодого опричника и купца калашникова, сочинение по
    ахматовой час мужества пробил
    на наших часах и мужество нас не,
    сочинение на тему лень как ржавчина разъедает быстрее чем
    труд изнашивает, сочинение по тексту паустовского о сожалении людей всегда мучают
    разнообразные, итоговое сочинение
    по литературе 11 класс 2017 шаблон написания сочинений,
    сочинение по русскому языку на тему интервью 7 класс
    по русскому языку, сочинение по
    тексту.впервые в жизни я поймал себя на том сочинение егэ и напишите сочинение рассуждение раскрывая смысл высказывания шанского на
    примере) получится вполне редкостным и обследовано на
    Это в целом позволит не навести
    недоверий у учителей. Купить лекцию на нашем сайте sochrulit – это
    осуществимо. Договор на реферат совершается прямо у редактора,
    без посреднические услуги.

    Перечисленное даёт возможность общаться
    школьнику с исполнителем, наблюдать лично процесс проведения курсовой работы, вводить доработки и конфигурации.
    С целью создания эссе, в качестве базы имеют
    возможность браться материалы из любых сборников, тот который
    укажет школьник. Цена за работу влияет от:
    требуемых сроков сдачи; конструкции взятой задачи; лишних заданий.

    Для спецов нашего вебсайта совершение
    различного заказа разнообразной тематики не будет
    составлять большого труда.

    Параметры оценивания окончательного реферата и изложения
    образовательными организациями, реализующими
    учебные планы высшего объединенного образования:

    Соотношение вопросу;
    Состав выражения;
    Доказательство. Сбор литературного материала (статей);
    Логика повествования;
    Формирование и закон обсуждения;
    Употребление составляющих языка исходного содержания;
    Качественность письменной разработки;

    Центральная формула сайта – оказать
    помощь школьникам и выпускникам самостоятельно, а главное грамотно, записывать
    студенческие проекты (курсовые, самостоятельные работы, лекции).
    Авторы публикаций – профессиональные работники школьных работ на заказ:
    сочинение на тему на какие жизненные вопросы
    может помочь ответить тебе литература, конспект урока русского языка 7 класс сочинение на лингвистическую тему, урок русского языка в 3 классе
    сочинение по картине девочка с персиками, что такое
    неуверенность в себе сочинение рассуждение 15.3 по одноралову, радость что приносит человеку в природе радость сочинение рассуждение 15.3, сочинение на тему в чем смысл названия драмы островского гроза сочинение, сочинение рассуждение на тему городской человек редко встречается с землей, для чего
    нужны детективы на примере 1-2 произведений
    сочинение 5 класс, сочинение на тему трагедия раскольникова в романе преступление
    и наказание, сочинение по роману тургенева отцы и дети анализ эпизода смерть базарова, есть много способов
    сделать карьеру но самый верный из них-родиться
    в нужной семье сочинение,
    сочинение 7 класс нравственный облик человека в
    древнерусской литературе, сочинение жизнь и быт сибирской деревни в рассказе конь с розовой гривой,
    сочинение по тексту солоухина.
    москва поглощает огромное количество цветов, когда
    при берге произносили слово родина сочинение по
    русскому языку егэ, сочинение по
    теме сатирическое обличение чиновников в
    поэме мертвые души, прав ли достоевский увидевший в базарове признак великого сердца сочинение, сочинение на тему мы в
    ответе за тех кого приручили я понимаю эти слова так, сочинение на тему мой взгляд на проблему
    отцов и детей в наше время сочинение, педагогический сочинение
    эразма роттердамского было одним из
    источников, сочинение по тексту в одной из недавних телепередач где велась бурная дискуссия, сочинение
    на тему моя комната 6 класс описание
    по русскому языку по плану, сочинение на тему золотая пора
    детство толстого и горького 7 класс кратко, сочинение
    на тему и с точки зрения результативности
    счёт пятнадцать шесть, сочинение все
    мы любили классного хотя нельзя сказать чтобы очень уважали, сочинение справедливость без силы беспомощна а
    сила без справедливости деспотична,
    сочинение на тему какие чувства могут быть не подвластны разуму отцы и дети, сочинения мастерство изображения мира человеческих чувств бунина и куприна, сочинение
    на тему обломов и обломовщина в романе и.а гончарова обломов,
    автобус все катит и катит по
    сверкающему зеркалу асфальта туда сочинение, сочинение на тему вся сила
    суждения содержится в сказуемом.

    без сказуемого не может
    быть суждения, сочинение по картине
    юона конец зимы полдень картина художника к.ф.юона, сочинение по английскому языку мой рабочий день студента на английском, напишите небольшое сочинение ответы на вопросы чему
    посвящен рассказ муму, сочинение
    на английском про достопримечательности россии на английском, сочинение на тему образ пугачёва в фольклоре произведениях пушкина и есенина, сочинение рассуждение на тему современная
    молодежь какая она сочинение, клод
    моне картины лондон парламент описание картины сочинение 3 класс,
    большинство людей убеждено что рассказы должны быть
    поучительны сочинение, полное собрание сочинений т.г.
    шевченко 1914 г. издание л.м. ротенберга,
    сочинение на тему петя и гаврик по книге в.
    катаева белеет парус одинокий, напиши фамилии композиторов и жанры этих сочинений романс ноктюрн баллада пастораль, горе от ума сочинение кто чацкий победитель или побежденный сочинение, сочинение по
    литературе на тему образ петербурга
    в романе достоевского преступление и наказание и сочинение размышления о человеческом счастье и
    различиях в его понимании, сочинение по
    комедии грибоедова горе от ума на тему фамусовское общество а с, сочинение
    зачем я жил для какой цели родился
    трагедия судьбы григория печорина,
    сочинение по кавказскому пленнику жилин и костылин разные
    судьбы 5 класс, всепобеждающая сила любви и
    творчества в романа мастер и маргарита сочинение,
    мини сочинение как я понимаю
    смысл названия рассказа конь с розовой гривой, сочинение на
    тему мотивы лирики лермонтова в романе герой нашего времени, сочинение по тексту бежина
    кончался сентябрь небо мутнело наливалось свинцом, духовные искания андрея болконского в романе война и
    мир сочинение в кратце, сочинение что такое красота по тексту васильева уродина что такое
    красота, сочинение какую роль в
    жизни человека играет семейное воспитание сочинение, мцыри сочинение на тему
    мцыри как романтический герой
    8 класс по плану. Специалисты веб-сайта
    отслеживают за преобразованиями
    в системе обучения и на условиях данного приготовляем материалы для вас.

    Литературные произведения школьной плановой программы: Барто А.
    “Знаю, что надо придумать” (стихи),
    “Страшный рассказ”, Былины: “Добрыня Никитич”, “Добрыня и Змей”, “Илья Муромец и Соловей Разбойник”, Ким Ю.
    “Летучий ковёр” (стихи), “Мещерская сторона”, Пушкин А.
    “Повести Белкина”, Брэдбери Р.
    “Третья экспедиция”, “Домино”, Лондон Д.
    “На берегах Сакраменто”, “Первая любовь”, Лондон Д.
    “Под палубным тентом”, Есенин С., Поэзия “серебряного” века, Маяковский В.
    Стихотворения, Стихи о войне Симонов К., Авторская песня:
    Высоцкий В. возможно перекачать и смотреть на веб-сайте online.

    Ответы по литературе (сочинение критическое отношение к себе вот что делает человека по настоящему умным, сочинение
    образ григория добросклонова в поэме кому на руси жить хорошо, сочинение по тексту дроганова я даже не помню
    как называлась та книга сочинение, короленко в дурном обществе сочинение путь васи к правде и добру кратко, сочинение на тему почему н в гоголь назвал мертвые души поэмой сочинение, сочинение рассуждение объясните как вы понимаете смысл финала текста мчатся, однажды летом наша семья отдыхала в эстонии на берегу озера.
    сочинение, сочинение на тему великая отечественная война в
    литературных произведениях,
    напишите небольшое сочинение по одной из тем я и компьютер плюсы и минусы,
    сочинение на английском
    языке для 5 класса достопримечательности россии, сочинение егэ человек любит место своего рождения и воспитания сочинение, сочинение мы живём в такое время
    когда между разными странами сочинение,
    сочинение на тему радость одиноких дум мотивы и образы бунинской
    лирики, количество универсальных символов с каждым годом растет
    сочинение проблема, сочинение по русскому языку 5 класс дни недели рассказывают о себе 5 класс, сочинение
    книга о войне которая меня взволновала шолохов судьба человека, сочинение на тему сатирические темы и мотивы
    в поэзии а.к толстого сочинение, сочинение что значит быть счастливым по рассказам
    чехова бунина куприна 8 класс,
    в правда сони мармеладовой в романе преступление и наказание сочинение, знание без нравственной основы
    ничего не значит сочинение рассуждение, сочинение по роману
    тургенева отцы и дети на тему проблема отцов и детей,
    сочинение на тему как понимают
    счастье герои и автор поэмы кому на руси жить
    хорошо, сочинение рассуждение на
    тему любое повторение двукратное или многократное, сочинение по войне и миру на тему отрицательные герои
    в романе война и мир, краски и свет в природе надо не столько наблюдать сколько
    ими попросту жить сочинение, сочинение рассуждение примеры сочинений для 5 класса по русскому языку, сочинение жизненные ценности по тексту алексина меня
    ждали шестнадцать лет, сочинение на тему истинное добро бескорыстно в рассказе уроки французского, сочинение 3 класс
    на тему смешной случай из моей жизни 3 класс короткие, напиши сочинение картинки весны используй глаголы настоящего времени, пустой тратой времени являются попытки оценить взаимоотношения сочинения, сенина русский
    язык сочинение на егэ курс интенсивной подготовки ответы,
    сочинение по рассказу распутина уроки
    французского на тему уроки доброты, сочинение по русскому
    языку на тему новые слова в современном русском языке,
    сочинение рассуждение на тему мой любимый
    школьный предмет 5 класс биология, напишите сочинение по одной
    из пословиц бесполезно носить дрова в лесу, сочинение на тему мой
    любимый праздник 8 марта на
    английском с переводом, сочинение по тексту в.

    солоухину есть в нашей реке такие глухие и укромные места,
    сочинение революция и гражданская война глазами писателей
    разных поколений, написать сочинение
    по тексту все собрались.сначала речь держал председатель здешнего колхоза, сочинение по
    литературе на подвиг народа в великой отечественной войне) помогут получить отличную отметку и дадут
    возможность отлично окончить

  • Hi to alⅼ, it’s in fact a good for me tօ pay а quick visit tһis site, іt
    consists of priceless Informɑtion.

  • whoah this blog is fantastic i really like reading your articles.
    Stay up the good work! You realize, lots of persons are looking round for this info, you can aid them greatly.

  • Hello to every body, it’s my first go to see of this website;
    this web site contains amazing and truly fine data
    in favor of readers.

  • We absolutely love your blog and find most of your post’s to be exactly I’m looking for.
    Does one offer guest writers to write content for yourself?

    I wouldn’t mind creating a post or elaborating on a number of the subjects you
    write with regards to here. Again, awesome website!

  • I’m really enjoying the theme/design of your site. Do you
    ever run into any internet browser compatibility issues?
    A number of my blog audience have complained about my blog not operating
    correctly in Explorer but looks great in Firefox. Do you have any solutions to help fix this issue?

  • Чтобы запустить казино Вулкан нажмите Open.

    Also visit my blog; скачать игровые автоматы вулкан –

  • Premium quality, 100% PVC playing cards by Dal Negro.

    My page … play blackjack online Free practice;

  • Thank you for another fantastic post. The place
    else may anyone get that kind of information in such a perfect approach of writing?

    I have a presentagion subsequent week, and I’m on the search for such information.

    Feel free tto visit my weblog – 안전사이트

  • Good post. I’m experiencing many of these issues as well..

  • If all of your friends are going in Top Toys for Christmas 2018 golf art
    prints and photographs of tiger woodsand Arnold palmer why don’t
    you proceed to decorate your living room with your prints which are
    certainly gonna result in the alteration that you want inside your living room.
    And talking about the most prominent causes of entertainment, TV shows are those that
    stay ahead in race. A little patience could very well reward you using a nice picture of the frog or perhaps a dragon fly.

  • I do accept as true with all of the concepts you have presented on your post.
    They are very convincinng and can certainly work.
    Nonetheless, the posts arre tooo brief for starters.

    May just you please proloong them a bit from subsequent time?
    Thankks for the post.

  • Thank you for another wonderful article. The place else may anybody get that type of information in such an ideal approach of writing?
    I have a presentation subsequent week, and I am on the search for such

  • Log on now andd flick thru websites that have these improvement trackers obtainable and discover how they work.

  • I like this site because so much utile material on here :D.

  • It’s an amazing paragraph designed for all the internet users; they will get advantage from it I
    am sure.

  • WOW just what I was searching for. Came here by searching for Brazilian cocktails

  • Hi there to every one, the contents existing at this website are genuinely awesome for
    people knowledge, well, keep up the nice work fellows.

Leave a Reply

To create code blocks or other preformatted text, indent by four spaces:

    This will be displayed in a monospaced font. The first four 
    spaces will be stripped off, but all other whitespace
    will be preserved.
    Markdown is turned off in code blocks:
     [This is not a link](

To create not a block, but an inline code span, use backticks:

Here is some inline `code`.

For more help see

You can use these HTML tags

<a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <s> <strike> <strong>